单增李斯特菌溶血素O的原核表达及纯化

摘要：

目的 原核表达并纯化单增李斯特菌溶血素O(Listeriolysin O,LLO).方法 PCR扩增LLO hly基因,并插入pET-32a载体,构建重组表达质粒pET-hly,转化入大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达,切胶纯化重组蛋白,并进行Western blot分析.结果 克隆的hly基因长1515 bp,与GenBank中登录的hly基因的核苷酸序列同源性为99％；重组表达质粒pET-hly经酶切鉴定构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为55000,表达量占细菌总蛋白的45.2％；纯化的重组蛋白可与单增李斯特菌阳性血清反应.结论 已成功原核表达并纯化了LLO,为下一步诊断试剂盒的研制奠定了基础.

关键词：单增李斯特菌、李斯特菌溶血素、原核细胞、基因表达、纯化

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分类号：R378.99+4;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：辽宁省教育厅课题L2010260

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1647-1649