Ⅰ型登革病毒D06063株人二倍体细胞适应株的筛选及纯化
目的 筛选Ⅰ型登革病毒(Dengue virus,DV)中国株D06063人胚肺二倍体细胞KMB17的适应株,经噬斑纯化后,分析其生物学特性.方法 将Ⅰ型DV中国株D06063在C6/36细胞上进行扩增,采用微量滴定法测定病毒的感染性滴度;RT-PCR法鉴定DV型别；病毒连续以4.0 MOI的量感染KMB17细胞,传代至病毒完全适应在细胞内扩增,再连续传10代,筛选出KMB17细胞适应株,并进行3轮噬斑纯化；免疫荧光法检测纯化病毒,电镜观察病毒颗粒的形态.结果 在C6/36细胞上扩增的Ⅰ型DV D06063株的滴度为6.0 lg CCID5o/ml,经RT-PCR可扩增出511 bp的DV特异基因和482 bp的Ⅰ型DV型特异性基因；病毒感染KMB17细胞后,可产生明显的细胞病变,至第10代,病毒的感染性滴度达峰值,为6.75 lg CCID50/ml;纯化的病毒经免疫荧光检测呈阳性,电镜观察显示病毒形态正常.结论 成功筛选出传代稳定性好、病毒扩增量高的Ⅰ型DVKMB17细胞适应株,纯化的病毒株保持了原始毒株的基本生物学特性.
登革病毒、人胚肺二倍体细胞、噬斑纯化、生物学特性
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R373.3+3;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
云南省科技厅社会发展科技计划项目2011CA016;中国医学科学院病原生物学研究所中央级公益性科研院所科研业务费项目2009IPB102;中国医学科学院医学生物学研究所引进人才项目IMB2009RC01
2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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