戊型肝炎病毒ORF2蛋白与新型融合标签Halo Tag的融合表达

摘要：

目的 在大肠杆菌KRX中表达戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV) ORF2与新型融合标签Halo Tag融合蛋白.方法 采用RT-PCR法从4型HEV毒株中扩增ORF2基因部分片段(aa 382 ～ 620),插入含新型融合标签Halo Tag的原核表达载体pFN 18the中,构建重组表达质粒pFN 18the-ORF2,转化大肠杆菌KRX,鼠李糖诱导表达Halo-ORF2融合蛋白,纯化后Westem blot分析融合蛋白的反应原性.结果 经RT-PCR扩增出717 bp的目的基因片段；重组表达质粒pFN 18the-ORF2经双酶切和测序鉴定构建正确；表达的融合蛋白Halo-ORF2相对分子质量为57900,表达量约占菌体总蛋白的15％,以包涵体形式表达,纯化后纯度达90％以上,可与HEV IgG阳性血清特异性结合.结论 在大肠杆菌KRX中表达了Halo-ORF2融合蛋白,为HEV结构蛋白抗原表位的筛选及戊肝血清学诊断的研究奠定了基础.

关键词：肝炎病毒,戊型、ORF2蛋白、Halo Tag、融合蛋白、原核细胞、基因表达

所属期刊栏目：25

分类号：R373.2+1;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：云南省教育厅基础研究面上项目2011Y382

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1583-1586