鹅细小病毒VP3蛋白的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP3蛋白.方法 将GPV VP3基因重组表达质粒pGEX-6P-VP3转化入大肠杆菌BL21 (DE3)plysS内,IPTG诱导表达;用Sepharose 4B(Prepacked Glutathion)亲合层析柱纯化可溶性和不溶性包涵体蛋白,并进行SDS-PAGE、Western blot及Dot-ELISA鉴定.结果 表达的GST/VP3融合蛋白相对分子质量为85 000,主要以不溶性包涵体形式存在;纯化的可溶性蛋白和包涵体蛋白含量分别为2.20和3.30 mg/ml;纯化的GST/VP3融合蛋白能被鹅抗GPV多克隆抗体特异性识别.结论 原核表达并纯化了GPV VP3蛋白,为进一步研究其功能和免疫学特性及研制基因工程亚单位疫苗和新型抗原制剂奠定了基础.
鹅细小病毒、VP3蛋白、原核细胞、基因表达、纯化
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Q786;R392-33(基因工程(遗传工程))
2013-01-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1307-1309,1314