DNA聚合酶中宿主细胞核酸残留的分析

摘要：

目的 分析市售不同厂家DNA聚合酶中的宿主细胞核酸残留.方法 根据E coli 16S rRNA基因序列设计特异引物及探针,建立基于Taqman探针技术的Real-time PCR检测方法,检测基因工程制品中E.coli的核酸残留.结果 建立的Real-time PCR法检测市售不同厂家的DNA聚合酶中均有宿主细胞E.coli核酸残留,但不同来源的DNA聚合酶其宿主细胞核酸残留量不同.结论 应用PCR方法检测基因工程产品,尤其是E.coli制备的生物制品时,应注意DNA聚合酶中核酸残留对检测结果的影响;应用Real time PCR法定量检测时,建议将Ct值控制在30以内,以减小DNA聚合酶背景残留物的影响.

关键词：DNA聚合酶、核酸、残留物、实时聚合酶链反应、探针

所属期刊栏目：25

分类号：R392-33

资助基金：国家质检总局科技计划项目2011IK206

在线出版日期：2012-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1223-1224,1229