重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白受体结合活性检测方法的改进

摘要：

目的 对重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体(Tumor necrosis factor receptor,TNFR)-抗体融合蛋白的受体结合活性检测方法进行改进.方法 采用夹心ELISA法对系列稀释的重组人Ⅱ型TNFR -抗体融合蛋白供试品和参比品进行检测,通过四参数方程拟合,计算二者的半数有效浓度(EC50),分析其受体结合活性.对改进的方法进行精密性和准确性验证,并与原方法进行比较.结果 重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白供试品和参比品均存在量效关系,符合四参数方程y=(A - D)/[1+(X/C)B]+D;3批重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白经3次测定,受体结合活性分别为(133±8)、(114±4)和(138±9)BU,符合其质量标准中受体结合活性65～135 BU的规定,变异系数分别为6.02％、3.51％和6.52％;1批供试品经3次重复测定,回收率为(107.67±7.50)％;3批供试品采用原方法和改进方法分别重复测定3次,受体结合活性差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 改进的方法精密性好,准确性高,可作为重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白受体结合活性的常规检测方法.

关键词：重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白、受体结合活性

所属期刊栏目：25

分类号：R392-33;Q78

资助基金：国家科技重大专项2009ZX09370-001

在线出版日期：2012-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1207-1210