抗猪呼吸与生殖综合征病毒Nsp9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定

摘要：

目的 制备抗猪呼吸与生殖综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) Nsp9蛋白单克隆抗体,并进行初步鉴定.方法 用纯化的重组Nsp9蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗PRRSV Nsp9蛋白单克隆抗体,采用Western blot和间接免疫荧光试验分析单抗的特异性;使用免疫球蛋白标准亚类鉴定试剂盒鉴定单抗的亚类;将杂交瘤细胞分别保存1、2、3、4个月后复苏,采用间接ELISA法检测细胞分泌抗体的能力.结果 共获得3株可稳定分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为2D6、3C11和4E6,其细胞培养上清的ELISA效价分别为1:6 400、1:3 200和1:1600,腹水的ELISA效价分别为1:640 000、1:512 000和1:256 000.3株单抗均可与Nsp9蛋白和PRRSV特异性结合;2D6和3C11株单抗的Ig亚型为IgG1,4E6株单抗为IgM亚类抗体;3株杂交瘤细胞保存4个月均能稳定分泌单抗.结论 已制备抗PRRSV Nsp9蛋白单克隆抗体,其特异性高,稳定性良好,为建立鉴别自然感染与注射疫苗感染PRRSV的诊断方法提供了材料.

关键词：猪呼吸与生殖综合征病毒、Nsp9蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：R392-33

资助基金：吉林大学大学生创新性实验项目2011C81326

在线出版日期：2012-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1180-1184