深黄被孢霉高产诱变菌株抑制消减杂交文库的构建

摘要：

目的 构建深黄被孢霉高产诱变菌株抑制消减杂交文库.方法 采用抑制消减杂交( Suppression subtractive hybridization,SSH)技术,以深黄被孢霉高产诱变菌株(高产菌株)和原始菌株为材料,构建消减cDNA文库.以高产菌株cDNA为试验组,原始菌株cDNA为对照组,进行两次消减杂交和两次抑制性PCR,将第2次PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TG1,通过蓝白斑筛选阳性克隆,并进行PCR鉴定.结果 文库的插入片段集中在250～750bp之间,所长出的菌落中91％为白色克隆,挑取96个克隆进行PCR筛选,获得78个阳性克隆,其中单一扩增条带的克隆约占82％.结论 利用SSH技术成功构建了深黄被孢霉高产诱变菌株差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选和鉴定深黄被孢霉高产诱变菌株特异表达基因奠定了基础.

关键词：深黄被孢霉、抑制消减杂交、差异表达、基因文库

所属期刊栏目：25

分类号：R379.9;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目资助31171657;黑龙江省青年科学基金项日Q2010093;黑龙江省研究生创新科研项目YJSCX2011-260HIJ

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：825-828