NDM-1基因的克隆表达及生物信息学分析

摘要：

目的 克隆鲍曼不动杆菌blaNDM-1基因,对NDM-1进行生物信息学分析,表达并纯化重组NDM-1蛋白.方法 PCR扩增鲍曼不动杆菌NDM-1的blaNDM-1基因,克隆至pMAL-p2X质粒,构建重组原核表达质粒pMAL-p2X::NDM-1,对NDM-1进行生物信息学分析.将重组表达质粒转化大肠杆菌Tb1,IPTG诱导表达,经亲和层析纯化重组蛋白MBP-NDM-1.结果 重组表达质粒pMAL-p2X::NDM-1经双酶切和测序证实构建正确;生物信息学分析表明,NDM-1的相对分子质量为28 487.86,等电点为5.89,1～28氨基酸为NDM-1的信号肽序列,与其他亚型金属β-内酰胺酶同源性很低;表达的重组蛋白相对分子质量约73000,主要以可溶形式表达;纯化后的重组蛋白浓度为1.72mg/ml.结论 表达并纯化了可溶性重组蛋白MBP-NDM-1,为后续NDM-1活性功能及其抑制剂的研究奠定了基础.

关键词：鲍曼不动杆菌、NDM-1、克隆、分子、基因表达、生物信息学

所属期刊栏目：25

分类号：Q786;R318.04(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：816-820