刚地弓形虫过氧化物氧化还原酶基因重组真核表达质粒的构建及表达

摘要：

目的 构建刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)过氧化物氧化还原酶(Peroxiredoxin,Prx)基因重组真核表达质粒,并在HEK293T细胞中进行表达.方法 以重组质粒pET-30a(+)/TgPrx为模板,PCR扩增TgPrx基因片段,插入真核表达载体p3×Flag-CMW-14,构建重组表达质粒p3×Flag-CMW-14/TgPrx,转染HEK293T细胞,RT-PCR和Western blot检测TgPrx基因的转录和蛋白的表达.结果 PCR扩增出591bp的TgPrx基因片段;重组真核表达质粒p3×Flag-CMW-14/TgPrx经PCR、双酶切及测序证明构建正确;转染重组表达质粒的HEK293T细胞可检测到TgPrx基因的转录和蛋白的表达.结论 成功构建了重组真核表达质粒p3×Flag-CMW-14/TgPrx,并在HEK293T细胞中正确表达,为进一步研制核酸疫苗奠定了基础.

关键词：刚地弓形虫、过氧化物氧化还原酶、真核细胞、基因表达

所属期刊栏目：25

分类号：R382.5;Q786(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金81071374

在线出版日期：2012-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：809-811