应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在蚕蛹中表达狂犬病病毒糖蛋白
目的 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在蚕蛹中高效表达狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)糖(G)蛋白.方法 从狂犬病病毒CVS-11株总RNA中扩增G基因片段,插入供体质粒pFastBac I-G中,构建重组供体质粒pFastBac I-G,转化大肠杆菌DH 10Bac,构建重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-G,将其转染BmN细胞,获得含G基因的重组杆状病毒.将重组病毒感染蚕蛹,收集血淋巴,进行Western blot分析.结果 重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-G经PCR鉴定证明构建正确;狂犬病病毒糖蛋白在重组杆状病毒感染的BmN细胞中和蚕蛹中获得正确表达,在蚕蛹中表达的重组蛋白可与His标记的单克隆抗体和狂犬病病毒阳性血清特异性结合.结论 成功构建了重组狂犬病病毒糖蛋白杆状病毒,并在蚕蛹中获得了表达,表达产物具有良好的抗原性.
杆状病毒表达系统、狂犬病病毒、糖蛋白、蚕蛹
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R373.9;Q786(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
公益性行业农业科研专项201103032
2012-10-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
797-800,804