长链人胰岛素样生长因子-1的分离纯化
目的 建立长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)的分离纯化方法.方法 将LR31GF-1毕赤酵母工程菌接种至30 L发酵罐进行高密度发酵,发酵液经离心、超滤浓缩后,采用SPSepharose FF阳离子交换层析、Phenyl SepharoseFF疏水层析、S-100凝胶过滤层析和DEAE Sepharose FF层析对发酵上清液中的表达产物进行分离纯化,测定蛋白浓度,计算蛋白收率,并分析纯化样品的浓度.采用MTT法检测各步纯化样品促NIH-3T3细胞增殖的活性.结果 纯化LR3IGF-1的蛋白总收率为28%,RP-HPLC纯度可达95%以上.随着纯化过程中样品纯度的增加,LR3IGF-1的活性也相应增强,各纯化步骤基本不影响LR3IGF-1的生物活性.结论 初步建立了LR3IGF-1的分离纯化工艺,其简便有效,为LR3IGF-1的规模化生产奠定了基础.
长链人胰岛素样生长因子-1、阳离子交换层析、疏水层析
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R587.1;R392-33(内分泌腺疾病及代谢病)
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
778-781