脑心肌炎病毒蚀斑纯化及滴度测定方法的建立
目的 建立脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)蚀斑纯化及滴度测定方法.方法 将EMCV系列稀释后接种至单层Veto细胞,覆盖甲基纤维素,出斑后挑取蚀斑进行扩增,收获病毒液.选取5个EMCV原液样品感染Veto细胞进行蚀斑滴度测定,经结晶紫染色计数蚀斑,计算病毒滴度.重复测定5次,验证蚀斑法的精密性,并与微量细胞病变法进行比较.结果 EMCV感染Veto细胞后,约48 h出现边缘整齐直径为0.5~ 1.5mm的蚀斑,经结晶紫染色后,可见清晰透明空斑,边缘清晰.5个EMCV原液样品经蚀斑法测得的病毒滴度在3.16×106~1×107 PFU/ml之间,变异系数为0.88%~2.07%;经微量细胞病变法测得的病毒滴度均大于3.16×107 PFU/ml,变异系数为1.63%~2.90%,表明蚀斑法精密性更好;两种方法经直线回归分析,具有线性相关性(r=0.810,P=0.097).结论 建立了简便直观的EMCV蚀斑纯化方法及精密性良好的蚀斑滴度测定方法,为EMCV的生物学特性及疫苗研究奠定了基础.
脑心肌炎病毒、蚀斑纯化、蚀斑滴定、微量细胞病变法
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R373.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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