PPE68基因重组卡介苗的构建及其免疫原性

摘要：

目的 构建携带结核分枝杆菌PPE68基因的重组卡介苗(BCG),并检测其诱导小鼠的免疫应答情况.方法 将带有分枝杆菌复制子OriM的穿梭质粒pBudCE4.1/PPE68/OriM电转化入BCG中,PCR鉴定重组BCG.用鉴定正确的PPE68/OriM重组BCG免疫BALB／c小鼠,每2周免疫1次,共3次,末次免疫后2周采血,分离血清,检测血清中IgG2a、IFNγ和IL-12水平;取脾、肺,分离脾淋巴细胞,检测经特异性蛋白刺激后淋巴细胞的增殖水平;进行脾CD4+和CD8+T淋巴细胞计数,计算CD4+/CD8+比值;检测脾、肺荷菌量并观察组织病理变化.结果 PPE68／OriM重组BCG经PCR鉴定构建正确;其免疫小鼠后,可诱导小鼠血清中IgG2a、IFNγ和IL--12水平显著增加(P＜0.05),脾淋巴细胞增殖显著(P＜0.05),CD4+和CD8+T细胞百分比增加,CD4+／CD8+T细胞比值降低,脾、肺均无菌落生长且未见明显病理改变.结论 成功构建了PPE68基因重组BCG,其免疫BALB/c小鼠能明显提高小鼠的Th1型免疫效应,有利于机体抗结核菌感染.

关键词：PPE68基因、结核分枝杆菌、卡介苗、免疫应答

所属期刊栏目：25

分类号：R378.91+1;R392.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30771922;30901280

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：665-668,675