直接用于PCR反应的芽胞杆菌基因组DNA抽提改良方法的建立
目的:建立一种直接用于PCR反应的芽胞杆菌基因组DNA提取的改良方法.方法:用十六烷基三甲基溴化铵(Cetyhrimethyl ammonium bromide,CTAB)-溶菌酶-冻融裂解法提取蜡样芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、纳豆芽胞杆菌基因组DNA,用紫外分光光度计测定提取的基因组DNA在230、260、280 nm波长下的A值,计算DNA浓度,并以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增.结果:采用改良CTAB法提取的基因组DNA A260/A280值均在1.8~2.0之间,A206/A230值均大于2.0,DNA浓度均大于110 μg/ml;PCR扩增产物均可见1 500 bp的清晰条带,浓度较高,未见其他特异条带.结论:CTAB-溶菌酶-冻融裂解法提取芽胞杆菌基因组DNA简单、高效,并可用于PCR反应,适用于临床分子生物学检验.
聚合酶链反应、基因组、提取、DNA、芽胞杆菌属
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R378.8;Q78(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
安徽省教育厅自然科学研究资助项目KJ2011B106;安徽省省级特色专业医学检验技术基金[2008]4;国家自然科学基金资助30871568
2012-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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