马流感病毒2个亚型单克隆抗体的制备及鉴定
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马流感病毒2个亚型单克隆抗体的制备及鉴定

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目的:制备马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)2个亚型的单克隆抗体,并进行鉴定.方法:将马流感病毒甲1型A/equine/布拉格/56 H7N7(简称H7N7)和马流感病毒甲2型A/equine/miami/63 H3N8(简称H3N8)分别接种SPF鸡胚,收获尿囊液,纯化后免疫BALB/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0细胞进行融合,筛选阳性杂交瘤细胞,采用细胞培养法和体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定.结果:筛选出能稳定分泌EIV H7N7单抗和H3N8单抗的杂交瘤细胞各2株,分别命名为3C2-B2、2B7-3A7和5G10-G12、5A10-2E3-2G4.3C2-B2分泌的单抗重链为IgM,轻链为k链,细胞培养上清和腹水中抗体效价分别为1∶512和1∶262 144;5G10-G12分泌的单抗重链为LgG2a,轻链为k链,细胞培养上清和腹水中抗体效价分别为1∶1 024和1∶1 048 576.2个亚型的单抗均具有良好的特异性.获得的杂交瘤细胞株连续培养2个月,培养上清中的抗体效价保持不变;冻存1个月复苏后,培养上清中的抗体效价接近原始值.结论:成功制备了EIV 2个亚型的单克隆抗体,为进一步研制EIV快速分型特异性诊断试剂及治疗制剂奠定了基础.

流感病毒A型、H7N7亚型、H3N8亚型、单克隆抗体

25

R373.1+4;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

国家质检总局基金20071K026

2012-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

601-604

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1004-5503

22-1197/Q

25

2012,25(5)

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