旋毛虫新生幼虫期特异性T314基因真核表达质粒的构建及表达

摘要：

目的 构建旋毛虫(Trichinella spirais)新生幼虫期特异性T314基因真核表达质粒,并在BHK细胞中进行表达.方法 从旋毛虫新生幼虫RNA中通过RT-PCR技术扩增无信号肽T314全长基因,定向克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,构建重组真核表达质粒T314-pEGFP-N1,脂质体法转染BHK细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,Western blot检测T314融合蛋白的表达.结果 重组真核表达质粒T314-pEGFP-N1经双酶切及测序证实构建正确；转染的BHK细胞48 h转染效率最高；表达的T314融合蛋白可与旋毛虫感染的猪血清发生特异性反应.结论 已成功构建了T314基因重组真核表达质粒T314-pEGFP-N1,并在BHK细胞中融合表达,为进一步研究旋毛虫包囊形成机制奠定了基础.

关键词：毛线虫、旋、新生幼虫、T314基因、真核细胞、基因表达

所属期刊栏目：25

分类号：R383.1+5;Q782(医学寄生虫学)

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：281-284