纤维蛋白胶抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用
目的 建立纤维蛋白胶抗体间接ELISA检测方法,并进行初步应用.方法 采用纤维蛋白胶作为包被抗原,建立检测纤维蛋白胶抗体的间接ELISA法,优化反应条件,并对方法的精密性及特异性进行验证.采用建立的间接ELISA法检测纤维蛋白胶免疫兔血清抗体.结果 间接ELISA法的最佳反应条件为紫外灯管垂直照射酶标板20 min后,选择0.05 mol/L 的碳酸氢钠溶液(pH 9.6)作为包被缓冲液,以10 μg/ml的纤维蛋白胶4℃包被过夜,以含10％小牛血清的PBS封闭,0.1％PBST为抗体稀释液,纤维蛋白胶多克隆抗体和HRP标记的羊抗兔IgG的工作浓度分别为1:2 500和1∶4000,反应条件均为37℃孵育lh,底物显色条件为37℃孵育15 min,终止液为2 mol/L硫酸.该方法精密性良好,特异性较强.以建立的间接ELISA方法检测给药1、2、4、6周的兔血清抗体,发现给药2周后兔血清抗体水平明显升高,6周时开始下降.结论 成功建立了纤维蛋白胶抗体间接ELISA检测方法,可用于兔免疫血清纤维蛋白胶抗体的检测.
纤维蛋白组织黏着剂、抗体、酶联免疫吸附测定
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R392-33
2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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