牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

摘要：

目的 制备牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gB蛋白单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA方法.方法 应用重组IBRV gB蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,利用IBRV全病毒免疫家兔制备多克隆抗体,采用方阵滴定法确定兔抗IBRV IgG多抗与单抗的最适工作浓度,建立双抗体夹心ELISA检测方法,并对该方法进行灵敏度和特异性验证.结果 获得了1株稳定分泌抗IBRV gB单抗的杂交瘤细胞株,命名为2C4；兔抗IBRVIgG多抗和单抗的最适工作浓度分别为2.620 9和2.634 1μg/ml,酶标二抗的最适稀释度为1∶30 000；应用建立的双抗体夹心ELISA法对100份IBRV阳性血清样品进行检测,结果均呈阳性,符合率为100％；检测牛口蹄疫病毒、牛流行热病毒、牛副流感3型病毒的结果均呈阴性.结论 成功制备了IBRV gB蛋白单克隆抗体,并建立了IBRV双抗体夹心ELISA检测方法,可用于牛传染性鼻气管炎的诊断和流行病学调查.

关键词：疱疹病毒Ⅰ型、gB蛋白、抗体、单克隆、酶联免疫吸附测定

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分类号：R392-33

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：206-208