A组人轮状病毒VP3基因的原核表达及鉴定

摘要：

目的 克隆并原核表达A组人轮状病毒( Rotavirus,RV)TB-Chen株结构蛋白VP3基因,并进行分子系统进化和基因分型.方法 采用PCR法扩增A组人轮状病毒TB-Chen株VP3编码基因,克隆至pETL载体上,构建重组原核表达质粒pET-VP3,转化大肠杆菌BL21(DE3),并进行表达.表达的重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定后,对VP3基因进行分子 系统进化及基因型分析.结果 重组表达质粒pET-VP3经双酶切及测序证实构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为98 000,以包涵体形式存在；重组VP3蛋白可被抗SA11株全病毒豚鼠免疫血清识别；迄今发现的A组RV VP3可分为7个基因型,TB-Chen株和SA11株VP3基因分别属于M2型和M5型.结论 成功原核表达了A组人RV TB-Chen株VP3蛋白,为进一步研究VP3的结构功能及开发新型RV疫苗、诊断试剂和治疗药物奠定了基础.

关键词：轮状病毒属、VP3基因、原核细胞、基因表达、基因分型

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分类号：R373.2;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：152-156