JTV1基因siRNA重组表达质粒的构建及其对K562细胞增殖的影响

摘要：

目的 构建JTV1基因siRNA重组表达质粒,转染K562细胞,鉴定其干扰作用.方法 人工合成靶向JTV1基因的siRNA干扰序列,克隆至载体pGeneSil-1上,构建重组表达质粒pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA,转染人K562细胞,经G418稳定筛选后,采用RT-PCR及Western blot法分别检测重组表达质粒对K562细胞中JTV1基因转录和翻译的影响；MTT法检测抑制JTV1基因的表达对K562细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA经测序证明构建正确；其转染K562细胞后,细胞JTV1基因的转录和翻译水平均明显降低；抑制JTV1的表达可促进K562细胞增殖.结论 已成功构建了pGeneSil-1-JTV1-1.1 siRNA质粒,并获得了稳定的JTV1基因表达受抑的K562细胞克隆,为进一步研究JTV1基因的功能及其与肿瘤的相关性奠定了基础.

关键词：JTV1基因、RNA干扰、K562细胞

所属期刊栏目：25

分类号：Q782;R73-36+2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30300449;国家中医药管理局02-03ZP52;重庆医科大学课题XBYB2007104

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：148-151,156