人乳头瘤病毒18型L1蛋白在毕赤酵母中的表达及其病毒样颗粒的免疫原性
目的 在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒18型(Human papilomavirus 18,HPV18)L1蛋白,纯化病毒样颗粒(Viruslike particles,VLPs),并检测其免疫原性.方法 将含HPV18 L1基因的酵母表达质粒pHPV18 L1电转化毕赤酵母X-33,甲醇诱导表达,重组HPV18 L1蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析后,经离子交换层析、分子筛层析纯化,采用SEC-HPLC分析纯度；动态光散射和透射电镜分析粒径分布和结构；并通过小鼠半数有效剂量(ED50)和大鼠抗体滴度测定分析其免疫原性.结果 HPV18 L1蛋白在毕赤酵母中获得了有效表达,相对分子质量约为55 000,可与小鼠抗HPV18 L1单抗特异性结合；经纯化的HPV18 L1 VLPs纯度为99％,且颗粒大小均一,直径约50 nm；经吸附铝佐剂后,免疫小鼠的ED50为0.006 68μg；并可诱导大鼠产生较高的抗体滴度.结论 HPV18 L1可在毕赤酵母中高效表达并自动形成VLPs,该VLPs经纯化、吸附铝佐剂后具有良好的免疫原性,为工业化生产HPV18 L1疫苗奠定了基础.
人乳头瘤病毒18、毕赤酵母、病毒样颗粒、免疫原性
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R373.9;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家"十二五""重大新药创制"2011ZX09102-001-22;上海市科技委员会基金08431901400
2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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