人FBP17基因重组真核表达质粒的构建及其在LO2细胞中的表达

摘要：

目的 构建人FBP17基因重组真核表达质粒,并检测其在人正常肝细胞LO2中的表达及对细胞存活率的影响.方法 用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切pEGFP-C1-FBP17质粒,胶回收FBP17基因片段,与p3X FLAG-CMV- 10载体连接,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-CMV-10/FBP17,LipofectamineTM法转染人正常肝细胞LO2,RT-PCR和Western blot法检测转染细胞中FBP17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平,XTT法检测其对转染细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒p3XFLAG-CMV-10/FBP17经双酶切及测序证实构建正确；转染该重组质粒的LO2细胞FBP17基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均明显增高,且该质粒转染对细胞存活率无影响.结论 成功构建了FBP17基因重组真核表达质粒,其可在LO2细胞中表达,且对细胞的存活率无影响,为进一步研究FBP17相互作用蛋白及其功能奠定了基础.

关键词：FBP17基因、LO2细胞、细胞骨架

所属期刊栏目：25

分类号：Q782;R73-36+2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金20803098;重庆市教育委员会科学技术研究项目KJ080301

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：32-35