鸡MDV L-meq基因与该病毒感染的鸡胚成纤维细胞中p53基因的相关性

摘要：

目的 探讨鸡马立克病病毒(Marek disease virus,MDV )L-meq基因与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)中P53基因的相关性.方法 双酶切质粒pMD 18-T-L-meq,获得L-meq基因片段,克隆入载体pcDNA3.1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-L-meq,转染CEF细胞,利用实时定量RT-PCR检测转染细胞中p53基因mRNA的表达量,TRAP法检测转染细胞中端粒酶的活性,流式细胞术检测转染细胞细胞周期的变化.结果 重组真核表达质粒pcDNA-L-meq经双酶切鉴定构建正确.转染L-meq基因后48 h,CEF细胞中p53基因mRNA的表达量略有升高,72 h时下降.转染L-meq基因后48、72 h,CEF细胞的端粒酶活性比未转染的CEF细胞分别高16、1个活力单位.转染L-meq基因后48 h,CEF细胞G0/G1期比例较转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞(对照)显著增加(P＜0.01)；转染后72 h,实验组Go/G1及G2/M期细胞比例较对照组显著增加(P＜0.01)；转染后48和72 h,S期细胞比例较对照组均显著减少(P＜0.01).结论 L-meq基因对MDV的增殖具有一定程度的抑制作用,在病毒的增殖过程中可能为一种转录抑制因子.

关键词：马立克病病毒L-meq基因、鸡胚成纤维细胞、基因、p53

所属期刊栏目：24

分类号：S831.7(家禽)

资助基金：国家自然科学基金30471284

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1442-1444,1453