分子尺寸排阻高效液相色谱法检测戊型肝炎类病毒颗粒
目的 采用分子尺寸排阻高效液相色谱(Size-exclusion HPLC,SE-HPLC)法检测戊型肝炎类病毒颗粒(Hepatitis E virus-like particle,HE VLP).方法 分别采用超速离心法和Sephacryl S-200HR凝胶层析法制备HE VLP,对两种方法 制备的HE VLP进行SDS-PAGE、Western blot、电镜观察、动态光散射及SE-HPLC分析,建立SE-HPLC定性、定量分析HE VLP的方法,并利用该方法 对不同时间点培养上清HE VLP进行定量分析.结果 SDS-PAGE及Western blot分析显示,两种方法 制备的HE VLP均可见相对分子质量约为50 000的目的蛋白条带,浓度和纯度基本一致,且具有相同的反应原性；电镜观察可见,超速离心法制备的HE VLP为直径约30 nm的均匀空心颗粒,层析纯化的HE VLP则为大量不规则的团块及少量空心颗粒；动态光散射分析显示,超速离心法制备的HE VLP只有1个峰,颗粒直径为27.2 nm,纯度大于98％,层析纯化的HE VLP颗粒半径2 ～120 nm不等；SE-HPLC分析显示,HE VLP含量在1～ 40 μg范围内与峰面积呈线性相关,且精密性良好；利用该法能够对病毒细胞培养液中的HE VLP进行实时定量.结论 SE-HPLC可以对HE VLP进行定性、定量分析.
分子尺寸排阻、高效液相色谱、戊型肝炎病毒、类病毒颗粒
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R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1220-1223
