艰难梭菌B毒素的纯化及其生物学特性

摘要：

目的 纯化艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)B毒素,并鉴定其生物学特性.方法 将艰难梭菌V PI10463株经透析培养,50％饱和硫酸铵盐析,酸沉淀,收集上清液浓缩后,先采用分子筛Sephacryl S-300层析,收集目标蛋白峰,再进行DEAE Sepharose FF和DEAE Sephadex A-25离子交换层析,并对纯化产物进行各项生物学特性鉴定.结果 最终纯化的艰难梭菌B毒素蛋白浓度为1.25 mg/ml;Vero细胞毒性为8.0×109CU/mg;经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈单一条带,相对分子质量约为220 000,纯度为99.9％；免疫双扩散试验显示单一沉淀线.结论 成功纯化了艰难梭菌B毒素,获得的B毒素纯度和细胞毒性较高,免疫反应性良好,为艰难梭菌毒素及其相关疾病的研究和防治奠定了基础.

关键词：艰难梭菌B毒素、纯化、生物学特性

所属期刊栏目：24

分类号：R378.8;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：兰州市科技计划发展项目2009-2-16

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1217-1219,1223