蛋白Ⅲ-α-银环蛇毒素融合蛋白表达质粒的构建及表达
目的 构建适合选择感染性噬菌体( Selectively infective phage,SIP)技术筛选的蛋白Ⅲ-α银环蛇毒素(α-Bungarotoxins,α-BTXs)融合蛋白表达质粒.方法 从银环蛇毒腺中提取总RNA,RT-PCR扩增α-BTXs基因,插入表达载体pTTMIN,转化E.coli XL1-Blue,IPTG诱导表达.经SDS-PAGE、Western blot及竞争抑制ELISA法检测融合蛋白的表达.结果 获得的α-BTXs基因序列与相关报道完全一致;融合蛋白表达质粒构建正确;融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白的20%,可与抗蛇毒素血清发生特异性反应,且保持了α-BTXs的抗原性.结论 成功构建了蛋白Ⅲ-α-BTXs融合蛋白表达质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白,为利用SIP技术筛选抗α-BTXs人源抗体奠定了基础.
α-银环蛇毒素、SIP技术、重组融合蛋白质类
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Q78(基因工程(遗传工程))
全军医药卫生基金06MA016
2011-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1162-1164,1173