叉头转录因子1基因沉默对水通道蛋白9在正常人肝细胞中表达的影响

摘要：

目的 观察叉头转录因子1 (Forkhead transcription factor 1,FoxO1)基因沉默对水通道蛋白9(Aquaporin 9,AQP9)在正常人肝细胞L-02中表达的影响.方法 将4条特异性干扰质粒FoxO1-shRNA1～4及阴性对照质粒FoxO 1-NP经脂质体介导瞬时转染L-02细胞,荧光显微镜下观察转染效率,筛选FoxO1基因沉默效率最佳的干扰质粒转染的肝细胞,经RT-PCR及Western blot法从mRNA及蛋白水平检测其对AQP9表达的影响,并在转染后不同时间点,经荧光定量PCR检测AQP9的转录时间谱.结果 4条特异性干扰质粒FoxO1-shRNA1～4均有不同程度的沉默效果,其中以FoxO 1-shRNA2沉默效果最佳,与对照组相比,AQP9在L-02细胞中的mRNA及蛋白水平的表达均下降,且差异均有统计学意义(P＜0.05);AQP9的表达随着转染后时间的延长而降低,在转染后60 h达抑制峰值,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 FoxO1基因沉默对AQP9在正常人肝细胞中的表达有明显的影响,为下一步采用染色质免疫共沉淀技术研究不同时间点FoxO1与AQP9启动子区IRE结合水平的动态变化提供了依据.

关键词：叉头转录因子类、RNA干扰、水通道蛋白质9、肝细胞

所属期刊栏目：24

分类号：Q411;Q78(普通生理学)

资助基金：国家自然科学基金30971335

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1157-1161