博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达及纯化
目的 构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(p24蛋白)基因重组表达质粒,原核表达p24蛋白,并进行纯化.方法 通过RT-PCR法从BDV感染的少突胶质细胞株(Oligodendrocyte,OL)中扩增p24基因片段,构建重组表达质粒pET-41a-p24,转化大肠杆菌BL21( DE3),IPTG诱导表达,并对表达的重组蛋白进行亲和层析纯化.结果 经双酶切鉴定和测序证实,重组表达质粒pET-41a-p24构建正确;表达的重组p24蛋白相对分子质量约24 000,表达量占菌体总蛋白的30%以上,主要以可溶形式表达;纯化的重组蛋白纯度达85%左右,可与鼠抗BDV p24单克隆抗体特异性结合.结论 已成功原核表达并纯化了重组BDVp24蛋白,为进一步建立BDV相关免疫学检测方法 奠定了基础.
博尔纳病病毒、磷蛋白类、原核细胞、基因表达、纯化
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S852.65+9.5;Q786(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划973计划2009CB918300
2011-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1148-1151