人IgG Fc标签融合表达载体的构建及H5HA1融合蛋白的表达

摘要：

目的 构建人IgG Fc标签融合表达载体,表达并纯化H5 HA1融合蛋白.方法 以pCAGGS载体为基础,依次插入IL-2信号肽及人IgG Fc片段,构建人IgG Fc标签融合表达载体.将H5 HA1克隆至含人IgG Fc标签的融合表达载体pCAGGS-F-IL-2/Fc中,瞬时转染293T细胞,进行融合蛋白的表达.表达的蛋白经Protein G亲和层析一步法纯化.结果 人IgG Fc标签融合表达载体经酶切及测序证明构建正确；在293T细胞中分泌表达的H5 HA1与人IgG Fc的融合蛋白HA1-Fc相对分子质量约75 000,转染后72和96 h表达量最高；纯化的融合蛋白纯度达90％以上,含量为1.63 μg/ml.结论 成功构建了人IgG Fc标签融合表达载体,表达并纯化了HA1-Fc融合蛋白,为流感病毒侵入及免疫机制的研究奠定了基础.

关键词：免疫球蛋白Fc片段、血凝素糖蛋白类、流感病毒、融合蛋白

所属期刊栏目：24

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技重大专项子课题2008ZX 10004-002

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1130-1133