固定金属亲和层析法纯化重组Kringle5蛋白工艺的建立

摘要：

目的 建立固定金属亲和层析法(Immobilized metal affinity chromatography,IMAC)纯化重组Kringle 5蛋白的工艺,为Kringle5蛋白的制备及生物学活性研究奠定基础.方法 常规制备IMAC蛋白上样样品,分别采用pH梯度洗脱和咪唑梯度洗脱的方法获取Krinoe 5蛋白洗脱液,分段收集洗脱样品,SDS-PAGE检测蛋白纯度,Western blot鉴定其反应原性.结果 咪唑梯度洗脱法获得的Kringle 5蛋白纯度达98%以上,得率为21.3 mg/柱体积,但不能充分将Kringle 5蛋白与杂蛋白分离；pH梯度洗脱法获得的Kringle5蛋白纯度在98%以上,得率为62.7 mg/柱体积,且可与杂蛋白充分分离.结论 已建立了重组Kringle 5蛋白的纯化方法,为Kringle 5蛋白的制备及生物学活性研究奠定了基础.

关键词：Kringle 5蛋白、固定金属亲和层析、纯化

所属期刊栏目：24

分类号：R392-33

资助基金：山西省科技攻关项目20080321078;山西医科大学博士启动基金03200823

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1101-1104