低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀中α1-抗胰蛋白酶的分离纯化
目的 采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂.方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sepharose 4B亲和层析、DEAE Sepharose Fast Flow一步离子交换层析提纯α1-AT,采用SDS-PAGE及区带扫描法分析纯化α1-AT的纯度;紫外分光光度计测定纯化α1-AT蛋白的浓度及回收率;Western blot检测其反应原性;胰蛋白酶抑制实验(TICT)检测纯化α1-AT的活性.结果 纯化α1-AT的纯度为97.3%;纯化过程中α1-AT蛋白的平均回收率为20.4%;纯化的α1-AT能与抗人α1-AT抗体特异性结合;平均比活为0.833 PU/mg.结论从FⅣ中成功纯化获得了纯度较高、具有生物学活性的α1-AT制剂.
α1抗胰蛋白酶、层析、活性
24
R392-33
2011-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1090-1093