甲型肝炎病毒单克隆抗体的筛选与初步应用

摘要：

目的 筛选甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)单克隆抗体(MAb),并初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法.方法 用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定MAb亚型；通过Western blot法鉴定MAb的特异性；SPA亲和层析法纯化MAb腹水,检测MAb的抗原识别表位；细胞培养法检测MAb的中和效价.确定双抗体夹心法包被物与酶标MAb的浓度,初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法,并考察方法的线性范围.结果 12株HAV单抗中,1株为IgM型,3株为IgG3型,3株为IgG2a型,5株为IgG2b型；10株MAb可特异性结合HAV的VP2蛋白；7株MAb识别相同的抗原表位；7号MAb中和效价最高,可达1:4096.建立的HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法的线性范围为15.625～250 u/ml,R2＞0.97.结论 筛选出1株特异性好、中和效价较高的IgG2b型MAb,可用于制备酶标抗体和ELISA检测试剂盒,应用于甲肝疫苗中抗原的检测.

关键词：抗体、单克隆、肝炎病毒、甲型、酶联免疫吸附测定

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分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：由“重大传染病诊断产品质量评价综合技术平台2009ZX 10004-805

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1081-1083