PrP(D178N)无细胞表达、抗原性及结构分析
目的 无细胞表达人178位点突变朊蛋白PrP(D178N),并分析其抗原性及结构.方法 提取人血液基因组DNA,应用PCR法突变人PrP 178号位点.以正常的PrP为对照组,分别连接至真核表达载体pcDNA3.1上,利用无细胞真核表达系统进行表达.Western blot分析表达的重组蛋白的抗原性,电镜观察抗原结构.结果 突变基因重组表达质粒构建正确;表达的PrP( D178N)蛋白相对分子质量约为28 000,对PK酶具有抗性,电镜下可见氧病相关纤维(Scrapie associated fibrils,SAF)存在.结论 已成功无细胞表达了 PrP(D178N),为后续其突变后空间构象及致病机理的研究奠定了基础.
朊蛋白、突变、无细胞表达
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R373.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然基金资助项目30972197;31072148;吉林省科技发展计划项目201105038
2011-12-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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