人肝细胞生长因子在毕赤酵母中的分泌表达及其活性
目的 在毕赤酵母中分泌表达人肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF),并检测其活性.方法 从真核表达质粒pRC / CMV-HGF中扩增HGF的编码基因,将其克隆人表达载体pPIC9K,构建重组表达质粒pPIC9K-HGF,电穿孔法转化毕赤酵母菌株KM71,PCR筛选阳性菌株,经甲醇诱导表达重组人HGF(rhHGF).表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,检测其对原代培养的大鼠肝细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒pPIC9K-HGF经酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约80000,表达量占菌体总蛋白的18%,可与兔抗人HGF多抗特异性结合,并可刺激大鼠肝细胞增殖.结论 在毕赤酵母菌中成功分泌表达了rhHGF,表达产物具有促进肝细胞增殖的活性.
肝细胞生长因子、毕赤酵母、肝细胞、细胞增殖
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Q786;R392-33(基因工程（遗传工程）)
山西省科技攻关项目20080311059-6;细胞生理学省部共建教育部重点实验室主任基金2010-01;山西医科大学科技创新项目01200713
2011-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
903-906,910
