羊型布氏菌WbkC基因真核表达质粒的构建及鉴定
目的 构建羊型布氏菌脂多糖0-侧链合成必需的甲酞基转移酶WbkC基因真核表达质粒,并进行鉴定.方法 提取16M株羊型布氏菌基因组DNA,KR扩增WbkC基因,克隆至psos载体上,构建诱饵重组质粒psos-WbkC,转化酵母菌株cdc25Ha,进行菌落PCR鉴定,并检测其在酵母双杂交系统中的自激活和定位情况.结果 诱饵重组质粒psos-WbkC经PCR双酶切及测序证明构建正确;重组酵母菌经PCR鉴定,可扩增出约780 by的目的 基因;诱饵质粒在酵母双杂交系统中无自激活且定位正确.结论 已构建了羊型布氏菌WbkC基因真核表达质粒psos-WbkC,可应用于酵母双杂交系统中,用于寻找巨噬细胞cDNA文库中与WbkC相互作用的蛋白质.
羊型布氏菌、WbkC基因、酵母菌、酿酒、真核细胞、基因表达
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R378.5;Q782(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金30972198/C180503
2011-11-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
889-892