羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒的构建及其免疫效果

摘要：

目的 构建羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒,并检测其免疫效果.方法 将前期克隆的P39基因片段连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,提取重组质粒,进行双酶切鉴定.以鉴定正确的重组质粒免疫BALB/c小鼠,凝集试验检测小鼠血清特异性抗体水平,ELISA法检测小鼠血清中细胞因子含量,MIT掺人法检测小鼠脾脏淋巴细胞的增殖效应.结果 重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39经双酶切鉴定构建正确;该重组质粒能够刺激小鼠产生特异性抗体(抗体峰值滴度为1:320),显著增加Thl型细胞因子的产生,并能够增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应.结论 成功构建了羊布氏菌P39基因重组真核表达质粒pcDNA3.1-P39,该重组质粒能够诱导BALB/c小鼠产生特异性免疫应答.

关键词：羊布氏菌、P39基因、真核细胞、基因表达、免疫效果

所属期刊栏目：24

分类号：R378.5;Q782(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：教育部"春晖计划"Z2007-1-01001;Z2007-1-01004;内蒙古自然科学基金2009MS1102;内蒙古自治区科技计划项目20080502;内蒙古自治区人才开发基金

在线出版日期：2011-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：882-884