一种人巨细胞病毒中和抗体效价快速检测方法的建立
目的 建立一种人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)中和抗体效价检测方法.方法 系列稀释的待检样品与等体积HCMV混合,中和反应l h后,接种MRC-5细胞,37℃孵育过夜,依次加入HCMV anti-IE1单抗、Biotin-SP-Goat anti Mouse IgG、Peroxidase-Labeled Streptavidin及底物,对HCMV感染细胞的细胞核进行特异性染色和定位,采集显微图像,计数每孔中感染细胞数.采用Reed-Muench计算样品的中和效价.并对建立的方法进行精密性、耐用性和专属性验证.结果 感染HCMV的MRC-5细胞,出现典型的CPE,且其细胞核出现特异性着色颗粒,而未感染的细胞则未出现着色颗粒.该方法重复性检测的变异系数为3.26%,中间精密性检测的变异系数为1.05%;样品与等体积中和病毒液于37℃中和反应55、60和65 min,中和抗体效价差异无统计学意义(P>0.05);水痘病毒感染的MRC-5细胞未出现特异性着色颗粒,10份不同类型的样品与MRC-5细胞共同孵育后,也未出现特异性着色颗粒.结论 已建立了一种HCMV中和抗体效价检测方法,该方法快速、客观,精密性高,耐用性好,专属性强,可用于血浆和IVIG中HCMV中和抗体效价的检测.
巨细胞病毒、中和抗体、免疫球蛋白
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R373.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2011-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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