磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及其鉴定
目的 制备磺胺二甲嘧(Sulfadimidine,SM2)啶单克隆抗体,并对其进行鉴定.方法 经小鼠腹腔免疫SM2-BSA抗原,采用常规技术进行细胞融合,间接竞争ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,有限稀释法进行亚克隆,硫酸铵-辛酸法纯化抗体,并鉴定其抗体效价、杂交瘤细胞染色体数量、相对分子质量、抗体亚型、亲和力和特异性.结果 筛选到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株3D7,细胞培养液上清和抗体效价分别为1:6.4×102和1:1.28×105;纯化后3D7抗体效价>1:128 000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2对,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为164280,亲和常数为6.09×108M-1,与6种磺胺类药物及青霉素、庆大霉素和泰乐霉素交叉反应IC5o大于1 mg/ml,交叉反应率小于0.01%.结论 已成功制备了SM2单克隆抗体,该抗体能满足建立免疫学检测方法的需要.
磺胺二甲嘧啶、抗体、单克隆
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R392-33
国家自然科学基金课题30671762;31000790
2011-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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