表达轮状病毒类病毒颗粒的重组毕赤酵母的制备及鉴定
目的 制备表达轮状病毒(Rotavirus,RV)类病毒颗粒(Virus-like particle,VLP)的重组巴斯德毕赤酵母.方法 优化并合成人RV VP2、VP6、VP4(P8血清型)和VP7(G1血清型)结构基因,分别转入改造的pPIC3.5K质粒,构建pPIC3.5K改-VP7-VP6-VP2-VP4共表达质粒,即重组G1P8质粒,电转化毕赤酵母GS115菌株,甲醇诱导表达.表达产物经Western blot鉴定,并经蔗糖密度梯度离心、分子筛层析和透射电镜观察,分析VLP的形成.结果 所构建的重组G1P8质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约41 000;发酵破菌液经分子筛纯化,在180 ml洗脱体积处出现的色谱峰经Western blot鉴定和透射电镜观察,为RV VLP形成的蛋白峰.结论 已成功构建了表达RV VLP的重组毕赤酵母菌株,并初步观察到了VLP,为开发新的RV疫苗奠定了基础.
轮状病毒属、类病毒、毕赤酵母
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K373.2;Q782(西亚（西南亚）)
2011-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
818-823
