共表达羊布氏菌P39基因与增强型绿色荧光蛋白基因逆转录病毒质粒的构建
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共表达羊布氏菌P39基因与增强型绿色荧光蛋白基因逆转录病毒质粒的构建

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目的 构建共表达羊布氏菌胞质结合蛋白P39基因和增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescert protein,EGFP)基因的逆转录病毒质粒.方法 提取羊布氏菌全基因组DNA,PCR扩增P39基因,连接至pMD19-T载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,经克隆筛选并进行序列测定后,将P39基因连接至逆转录病毒载体pRevIRES-EGFP的多克隆位点上,转化感受态大肠杆菌DH5α,提取重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP,进行酶切鉴定.结果 从羊布氏菌基因组中扩增出约 1 400 bp的P39基因,与GenBank中登录的羊布氏菌16M菌株P39基因序列同源性达99%;重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP经双酶切鉴定构建正确.结论 已成功构建了共表达羊布氏菌P39基因和EGFP基因的重组逆转录病毒质粒pRevP39-IRES-EGFP,为后续研究奠定了基础.

羊布氏菌、P39基因、绿色荧光蛋白质类、逆转录病毒

24

R378.5;Q782(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

教育部"春晖计划"Z2007-1-01001;Z2007-1-01004;内蒙古自然科学基金2009MS1102;内蒙古自治区科技计划项目20080502;内蒙古自治区人才开发基金

2011-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

782-784,790

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1004-5503

22-1197/Q

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