重金属铜离子单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA检测方法的建立

摘要：

目的 制备重金属铜离子单克隆抗体,并建立间接竞争ELISA检测方法.方法 利用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA将Cu(Ⅱ)与载体蛋白BSA和OVA偶联,制备免疫抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-BSA和检测抗原Cu(Ⅱ)-DTPA-OVA,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合筛选稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞株;制备腹水,测定抗体效价,鉴定抗体亚型,并检测其特异性;建立间接竞争ELISA检测方法,并与ICP-AES检测结果进行比较.结果 共筛选出3株稳定分泌抗重金属Cu(Ⅱ)-DTPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,选择其中的4C2E7株制备腹水.腹水抗体效价为1×106,抗体亚类为IgG1,该抗体除与Co(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)和Hg(Ⅱ)存在17.5%、8.75%和1.46%的交叉反应外,与其他7种金属离子的交叉反应率均较低.该法最低检测限为2.0 ng/ml,与ICP-AES法检测结果的总符合率超过94%.结论 已成功制备了重金属铜离子单克隆抗体,并建立了间接竞争ELISA检测方法.

关键词：金属、重、铜、抗体、单克隆、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：24

分类号：R392-33

资助基金：国家"863"高技术发展计划目标导向项目2008AA10ZA27

在线出版日期：2011-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：720-723