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靶向人原癌基因c-fos的shRNA表达质粒的构建及鉴定

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目的 构建靶向人原癌基因c-los的短发夹RNA(Short hairpin RNA,shRNA)重组真核表达质粒,并进行鉴定.方法 构建靶向人c-fos基因的shRNA重组表达质粒Psilencer 3.1-sic-fos,转染乳腺癌MCF-7细胞,采用RT-PCR法检测稳定转染细胞中c-fos基因mRNA的表达.结果 重组表达质粒Psilencer 3.1-sic-fos经PCR、双酶切及测序证明构建正确;重组表达质粒在mRNA水平明显抑制了MCF-7细胞c-fos基因的表达(P<0.05).结论 已成功构建了人c-fos基因shRNA重组表达质粒,为深入研究c-fos基因在肿瘤发生、发展过程中的作用提供了技术手段.

原癌基因蛋白质c-fos、RNA干扰、乳腺肿瘤

24

Q782(基因工程(遗传工程))

2011-09-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

682-684

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24

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