GalR2基因真核表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的 构建GaIR2基因真核表达质粒,并在HeLa细胞中表达.方法 从C57BL/6J小鼠海马组织中提取总RNA,RT-PCR法扩增GalR2基因,克隆至pEGFP-C1载体中,构建重组真核表达质粒pEGFP-GalR2.将重组表达质粒转染至HeLa细胞,荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位,RT-PCR和Western blot分别检测GalR2基因的转录及表达.结果 从C57BL/6J小鼠海马组织扩增出1 116 bp的GalR2基因;重组表达质粒pEGFP-GalR2经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;转染细胞融合基因的表达产物定位于细胞核,GalR2基因在mRNA及蛋白水平上均有表达.结论 已成功构建了GalR2基因真核表达质粒pEGFP-GalR2,并在HeLa细胞中成功表达了GalR2蛋自,为进一步探讨GalR2的生物学活性奠定了基础,也为寻找抗抑郁药物的靶点提供了新的思路.

关键词：受体、G蛋白偶联、GalR2基因、HeLa细胞、抑郁症

所属期刊栏目：24

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：653-656