脊髓灰质炎病毒Sabin2株结构蛋白VP1在昆虫杆状病毒表达系统中的表达

摘要：

目的 在昆虫杆状病毒表达系统中表达脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV)Sabin2株结构蛋白VP1.方法 从Sabin2疫苗原液中RT-PCR扩增PV结构蛋白VP1基因.克隆入pFastBac1质粒,转化含杆状病毒穿梭载体Bacmid的E coli DH 10Bac,获得重组杆状病毒表达质粒Bacmid-VP1,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-VP1.将第2代rBac-VP1感染sf9细胞,间接免疫荧光法检测VP1蛋白的表达,并优化感染条件.结果 重组杆状病毒表达质粒.Bacmid-VP1转化子可扩增出3 203 bp的目的 片段;第2代rBac-VP1的滴度为6×107 pfu/ml,其感染的sf9细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光,以不同MOI的rBac-VP1感染sf9细胞,VP1蛋白表达量差别不大,而在96 h内,随着感染时间的延长,VP1蛋白的表达量逐渐升高.结论 在昆虫杆状病毒表达系统中成功表达了PV Sabin2株结构蛋白VP1,为脊髓灰质炎亚单位疫苗的研制奠定了基础.

关键词：脊髓灰质炎病毒、Sabin2株、VP1蛋白、杆状病毒

所属期刊栏目：24

分类号：R373.2+2;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技支撑计划2008BAI54B03

在线出版日期：2011-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：625-628