广东眼镜蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及其酶活性质
目的 从广东舟山眼镜蛇毒中分离纯化磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2)组分,并分析其理化性质、酶活性质以及影响其酶活力的因素.方法 采用化学沉淀、Sephadex G-50凝胶过滤及UND Sphere S阳离子交换层析法对PLA2进行分离纯化;采用BCA法测定其蛋白浓度,HPLC法测定其纯度,SDS-PAGE测定其相对分子质量,PLA2测定方法测定其活力;并考察反应温度、反应pH值及金属离子对酶活性的影响及其热稳定性.结果 从广东舟山眼镜蛇毒中分离的PLA2蛋白浓度为0.6mg/ml,回收率为9.5%,HPLC纯度为99%,相对分子质量为14 300,比活力为133 μmol/(mg·min);最适反应温度及pH值分别约为60℃C和8.5;Ca2+和Mg2+可增强酶活力,K+、Ni2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Co2+和Cr2+对酶活力均有抑制作用;该酶具有较高的热稳定性.结论 从广东舟山眼镜蛇毒中分离纯化出一种高纯度的PLA2,该酶具有较高的最适反应温度和热稳定性.
磷脂酶A2、眼镜蛇属、蛇毒、分离和提纯、酶活性
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R392-33
2011-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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