大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合(1,25D3-Membrane associated rapid response steroid binding,1,25D3-MARRS)蛋白.方法 经RT-PCR扩增大鼠1,25D3-MARRS基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,M-NTA亲和层析纯化目的 蛋白,并进行Western blot鉴定.结果 重组原核表达质粒pET-32a-1,25D3-MARRS经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为77 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上,且具有良好的反应原性.结论 已成功表达并纯化了重组1,25D3-MARRS蛋白,为进一步研究其性质、功能及分布特点奠定了基础.
1、25D3-膜相关快速反应类固醇结合蛋白、原核细胞、基因表达、纯化、胃钙素
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Q786(基因工程（遗传工程）)
广东省科技计划项目2007B030700002;广东省科技攻关项目2008B011000003;白云区科技局项目2009-SZ-35
2011-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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