人Rac1基因shRNA表达质粒的构建及鉴定

摘要：

目的 构建人Rac1基因shRNA表达质粒,为提高卵巢癌放化疗的敏感性奠定基础.方法 根据GenBank中登录的人Rac1基因序列,应用shRNA设计软件设计并合成用于构建shRNA表达质粒的oligo DNA,构建shRNA重组质粒.将阳性Rac1基因shRNA重组质粒经脂质体介导转染卵巢癌Skov3细胞,48h后经RT-PCR筛选有效的shRNA重组质粒.结果 经限制性内切酶BamH I和Pst I酶切鉴定出阳性Rac1基因shRNA重组质粒,序列比对分析结果与理论序列完全一致.RT-PCR检测显示,转染pGPU6/GFP/Rac1-524的Skov3细胞Rae1基因mRNA的转录水平下降.结论 已成功构建人Rac1基因shRNA表达质粒,并筛选出有效的干扰质粒pGPU6/GFP/Rac1-524.

关键词：Rac1 GTP结合蛋白质、RNA干扰、卵巢肿瘤

所属期刊栏目：24

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省自然科学基金201015175

在线出版日期：2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：414-417