PPE68/Ipr1真核共表达质粒的构建及鉴定
目的 构建结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的真核共表达质粒,并在小鼠巨噬细胞BAW264.7中表达.方法 将结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠Ipr1基因分别亚克隆至含多启动子的共表达载体pBudCE4.1中,构建真核共表达质粒pBud68-Ipr1,转染RAW264.7细胞,通过RT-PCR及Western blot 法检测PPE68和Ipr1基因的转录和表达.结果 重组表达质粒pBud68-Ipr1经PCR、双酶切及测序证实,插入的PPE68和Ipr1基因片段序列正确;质粒转染RAW264.7细胞后,PPE68和Ipr1基因进行了转录和表达,基因编码产物相对分子质量分别为37 000和50 000.结论 已成功构建了真核共表达质粒pBud68-Ipr1,并在RAW264.7细胞中获得表达,为PPE68/Ipr1重组BCG的构建及其免疫保护作用的进一步研究奠定了基础.
结核病、PPE68、胞内病原体抗性基因1、巨噬细胞
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R378.91+1;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金30771922;30901280;重庆市自然科学基金2009BB5275
2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
410-413
