RNA干扰P115基因对胃癌细胞巨噬细胞移动抑制因子表达的抑制作用

摘要：

目的 构建高尔基体转运蛋白P115基因shRNA表达载体,探讨P115基因沉默对胃癌细胞株BGC-823中巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)表达的影响.方法 设计4对针对P115基因的shRNA序列,构建重组表达质粒,转染高表达P115的胃癌细胞株BGC-823.RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测P115及MIF的mRNA 和蛋白的表达.结果 4个P115基因shRNA质粒经单酶切和测序证实构建正确;转染BGC-823细胞后,均能抑制P115基因的表达,其中以pGPU6/GFP/Neo-shP115-2的沉默效果最好,其对P115基因mRNA表达的抑制率为75.07%,对P115蛋白表达的抑制率为70.97%;转染pGPU6/GFP/Neo-shP115-2后,MIF基因的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).结论 P115基因沉默后,BGC-823细胞MIF的表达明显降低,提示P115可能参与调节胃癌细胞MIF的表达,P115基因可作为研究胃癌发生发展分子机理的新靶点.

关键词：胃肿瘤、高尔基体转运蛋白、巨噬细胞移动抑制因子、RNA干扰

所属期刊栏目：24

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30672431

在线出版日期：2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：404-409